抗防腐剂型大肠菌群检验纸片
规 格：90袋/盒
适用范围：广泛应用于含防腐剂（包括苯甲酸、山梨酸及其盐类）的食品、饮料及保健品中的大肠菌群的数量检测。
检验方法：(参考GB 4789.3-2003)
① 样品处理：
以无菌操作将检样25ml（或25g）放于含有225ml灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内（瓶内预置适当数量的玻璃珠），经充分振摇或研磨做成1：10的均匀稀释液。固体样品最好用均质器，以8000～10000r/min的速度处理1min,做成1：10的均匀稀释液；用1ml灭菌吸管吸取1：10稀释液1ml，注入含有9ml灭菌生理盐水或其他稀释液的试管内，制成1：100的均匀稀释液；按上一步操作依次做10倍递增稀释液。
② 接 种：
根据食品卫生标准要求或对样本污染情况的估计，选择适宜稀释度的稀释液，吸取三份10 mL分别涂布于3袋大纸片；三份1 mL分别涂布于3袋小纸片；另取1 mL再稀释10倍后，吸取三份1 mL分别涂布于3袋小纸片。而后用手将检验纸片轻轻压平，袋口朝上竖直放置于恒温培养箱（35～37℃）内培养18～24h，然后观察结果。
③ 结果判断：
阴性结果：纸片保持紫蓝色不变，无论有否红色斑点或红晕均判为大肠菌群阴性。
阳性结果：纸片上呈现红色斑点或红晕，其周围变黄或整个纸片变黄均判为大肠菌群阳性。
④ 结果报告：
根据阳性反应的纸片数查相应的大肠菌群MPN表，得数据乘以稀释倍数，以此为结果，报告每１００ｍＬ（ｇ）检样内大肠菌群的MPN值（见附表）
注意事项：
1、 应避光低温（10℃以下）保存，并注意防潮，如发现纸片变为粉红色即为失效。
2﹑ 检查食（饮）品时，凡酸性检样应以100g/L无菌碳酸钠溶液调pH至中性后，方可进行稀释接种。
3、 可疑结果的判断：
大肠菌群菌量的多少与结果的显示密切相关，可出现3种不同现象:（1） 菌量较大（≥103cfu/mL），整个纸片变黄而又无红色斑点（或红晕）;（2） 菌量适中（102~103 cfu/mL），整个纸片也变黄，但有小而密集的红色斑点;（3） 菌量较少（≤102 cfu/mL），纸片可呈紫蓝色，并有散在或较密集的红色斑点，其周围变黄。因此菌量较大时，可能出现可疑现象。此时应通过加大样品稀释度或进一步做复发酵进行证实。其它可疑现象也可通过复发酵实验进行确认。
4 、 确认试验的方法：
进行确认试验，用灭菌摄子无菌操作将可疑纸片移种到乳糖发酵管里，置37 ℃ 24小时培养后，对其产酸产气者判为大肠菌群阳性，否则判为阴性。
附表：
大肠菌群最可能数（MPN）检索表（总接种量33.3ml,其中3份10ml水样，3份1ml水样，3份0.1ml水样）
|
阳性管数 |
MPN/
100ml |
95%可信限 |
阳性管数 |
MPN/
100ml |
95%可信限 |
|
10ml×3 |
1ml×3 |
0.1ml×3 |
下限 |
上限 |
10ml×3 |
1ml×3 |
0.1ml×3 |
下限 |
上限 |
|
0
0
0
0 |
0
0
0
0 |
0
1
2
3 |
<3
3
6
9 |
<0.5 |
9 |
0
0
0
0 |
1
1
1
1 |
0
1
2
3 |
3
6
9
12 |
<0.5 |
13 |
|
0
0
0
0 |
2
2
2
2 |
0
1
2
3 |
6
9
12
16 |
|
|
0
0
0
0 |
3
3
3
3 |
0
1
2
3 |
9
13
16
19 |
|
|
|
1
1
1
1 |
0
0
0
0 |
0
1
2
3 |
4
7
11
15 |
<0.5
1 |
20
21 |
1
1
1
1 |
1
1
1
1 |
0
1
2
3 |
7
11
15
19 |
1
3 |
23
36 |
|
1
1
1
1 |
2
2
2
2 |
0
1
2
3 |
11
15
20
24 |
3 |
36 |
1
1
1
1 |
3
3
3
3 |
0
1
2
3 |
16
20
24
29 |
|
|
|
2
2
2
2 |
0
0
0
0 |
0
1
2
3 |
9
14
20
26 |
1
3 |
36
37 |
2
2
2
2 |
1
1
1
1 |
0
1
2
3 |
15
20
27
34 |
3
7 |
44
89 |
|
2
2
2
2 |
2
2
2
2 |
0
1
2
3 |
21
28
35
42 |
4
10 |
47
150 |
2
2
2
2 |
3
3
3
3 |
0
1
2
3 |
29
36
44
53 |
|
|
|
3
3
3
3 |
0
0
0
0 |
0
1
2
3 |
23
39
64
95 |
4
7
15 |
120
130
380 |
3
3
3
3 |
1
1
1
1 |
0
1
2
3 |
43
75
120
160 |
7
14
30 |
210
230
380 |
|
3
3
3
3 |
2
2
2
2 |
0
1
2
3 |
93
150
210
290 |
15
30
35 |
380
440
470 |
3
3
3
3 |
3
3
3
3 |
0
1
2
3 |
240
460
1100
≥2400 |
36
71
150 |
1300
2400
4800 |
